磁珠法核酸提取试剂盒的核心原理在于通过特定条件迅速裂解样本,借助磁珠颗粒特异性吸附核酸,经过洗涤和洗脱,从而实现核酸的快速分离。使用该试剂盒提取的核酸具有高效性和稳定性,所纯化的核酸可广泛应用于酶切、反转录、PCR、RI-PCR、Southern blot等多种常见的下游实验流程。尊龙凯时的磁珠法核酸提取试剂盒目前已被广泛应用于多种生物样本中病毒核酸的提取、富集与纯化,处理后的产物可用于临床体外检测。
磁珠法提取试剂的常见成分包括SDS(十二烷基硫酸钠)。这种物质的特性包括:1、作为阴离子表面活性剂,对人体有微毒性;2、优秀的发泡剂,广泛应用于洗衣粉、牙膏、洗发水及灭火器中;3、易溶于热水,当水温超过8℃时,SDS的溶解度会显著提高,虽然在70℃以上的溶解度提升不明显。SDS在提取过程中能有效断裂分子内及分子间的氢键,进而使蛋白质的二、三级结构发生改变,促进核酸的释放。
另一种成分是yi基苯基聚乙二醇(Nonidet P40)。NP-40 是一种温和的非离子型去垢剂,1%浓度即可破坏细胞膜,但对核膜的影响较小。此外,弱阳离子螯合树脂(Chelex-100)可用于结合多价离子,尤其是高价金属离子,在低离子强度和锅煮条件下有效破裂细胞膜并使蛋白质变性。通过离心去除Chelex颗粒,与DNA的结合物质得以分离。
其他关键成分包括蛋白酶K(Protein K),它是一种强效蛋白溶解酶,有助于从核酸中释放DNA。聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100,曲拉通)也是重要成分之一,它在水中不解离且具有高度的稳定性,能够与生物膜中的脂质形成复合物。异硫氰酸胍(GITC)是一种强有力的蛋白质变性剂,能迅速破坏细胞结构,实现核酸与核蛋白的分离,同时也是经典RNA提取试剂TRIZOL的主要成分。
最后,乙二胺四乙酸(EDTA)作为一种优良的钙、镁离子螯合剂,有效抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解,此外Tris-HCl缓冲剂为裂解液及核酸提供了适宜的环境。综上所述,经典的裂解液几乎都含有去污剂(如SDS、Triton X-100、NP-40等)和盐(如Tris、EDTA、NaCl等),盐不仅提供合适的裂解环境,还能有效抑制样品中的核酸酶,保护核酸的稳定性。
通过选择高品质的试剂,尊龙凯时致力于为医学科研提供可靠的解决方案,助力生物医疗领域的前沿研究与应用。