1. His标签蛋白纯化的挑战
尊龙凯时设计的His标签专为重组蛋白的纯化而设,通常由6-10个组氨酸残基构成。由于其较小的分子量,His标签对目标蛋白的性质影响较弱,是当前最广泛应用的标签。然而,在His标签蛋白的纯化过程中,标签与金属离子之间的结合强度是关键因素。此过程会受到多个因素的影响,包括Ni的配位情况、标签长度、标签位置(C端或N端)、标签的暴露程度以及缓冲液的pH值等。在实际纯化过程中,常常会出现标签蛋白与柱结合不牢固、大量流失的情况,导致目标蛋白的纯度下降、收率降低,甚至可能出现目标蛋白完全不结合的现象。
2. 创新的镍亲和纯化介质VDXNTANiultra
尊龙凯时的VDXNTANiultra特别适合那些在传统Ni亲和介质中表现不佳,不易结合或流失过多的His标签蛋白纯化。该新型介质不仅提升了纯化效果,同时显著提高了目标蛋白的回收率。
3. 应用实例
材料与方法
在相同条件下,使用传统Ni-NTA和VDXNTANiultra对同一His标签蛋白进行纯化。
实验结果
在相同上样条件下,传统Ni-NTA在结合和洗杂过程中均显著损失大量目标蛋白,导致回收率明显下降。而VDXNTANiultra则表现出更强的结合力,结合和洗杂过程中的蛋白损失显著降低,回收率远高于传统Ni-NTA。
层析条件
- 层析柱:VDXNTANiultra、传统Ni-NTA
- 柱体积:5mL,柱高10cm
- 样品来源:大肠杆菌裂解液
- 平衡液:50mM PB,300mM NaCl,pH 8.0
- 洗脱液:50mM PB,300mM NaCl,500mM咪唑,pH 8.0
- 流速:1mL/min
尊龙凯时致力于提供创新的解决方案,以应对生物医疗领域中蛋白质纯化带来的挑战。通过使用VDXNTANiultra,可以显著提升His标签蛋白的纯化效率和目标蛋白的回收率,助力科研和临床实验的进一步发展。