本文题为《Radix Polygoni Multiflori派生外泌体样纳米颗粒的分子抗肿瘤机制》。本研究首次从传统中药何首乌（Radix Polygoni Multiflori, RPM）的汁液中分离出外泌体样纳米颗粒（ELNs），并证实其对抗肝癌具有显著的活性。尽管之前植物ELNs的研究主要集中在柠檬、山药和苦瓜等植物上，但RPM作为一种历史悠久的中药，其ELNs的分离与功能探究在这一领域中具有开创性意义。

创新突破

本研究全球首次从何首乌中成功分离出外泌体样纳米颗粒（ELNs），证实其通过调控细胞周期相关基因（如Cdkn1a、Cdc20）显著抑制肝癌细胞的增殖与迁移，同时在体内显示出靶向富集于肝脏的特性。这样的发现为天然药物开发提供了全新的载体模式，具有重要的科学价值。

研究方法

(1) 首次通过差异离心和超速离心从新鲜的RPM汁液中提取ELNs。这一方法避免了化学试剂的干扰，保持了ELNs的天然生物活性。ELNs的表征显示其平均粒径为1595nm，符合典型的外泌体粒径范围，且具有明显的杯状结构。

(2) 多维度验证抗肿瘤机制。通过体外细胞实验（增殖、凋亡、迁移抑制），我们通过CCK-8实验发现，RPM-ELNs（10⁹ particles/mL）处理24-72小时后，SMMC-7721肝癌细胞的活力显著下降。克隆形成实验结果表明，ELNs显著减少了细胞的克隆形成数量，显示出其抑制肿瘤细胞增殖的长期能力。此外，流式细胞术显示，经过处理的细胞中早期凋亡（Annexin V+）和晚期凋亡（PI+）细胞的比例显著升高。

(3) 通过RNA测序（RNA-seq）和生物信息学分析，我们系统性揭示了RPM-ELNs通过调控细胞周期相关基因（如Cdkn1a、Cdc20）和信号通路（如HIF-1、FoxO）发挥其抗肿瘤作用的分子机制。这种“表型-基因-通路”的多层次研究模式为天然产物抗肿瘤机制的探索提供了新的范式。

体内靶向性验证

通过体内外泌体示踪实验，发现RPM-ELNs在小鼠体内主要富集于肝脏，其次是脾脏和肺部。这表明何首乌外泌体具有天然的肝靶向性，这一特性可能归因于肝脏网状内皮系统对纳米颗粒的主动摄取，或ELNs表面特定蛋白（如整合素）与肝细胞受体之间的相互作用。这一发现为后续开发肝癌特异性纳米药物提供了重要依据。

本研究首次揭示了何首乌来源ELNs的抗肝癌活性及其分子机制，将传统中药与现代纳米技术相结合，为肝癌治疗提供了新型天然纳米药物候选，具有重要的基础科学和转化医学价值。未来的研究可以进一步优化ELNs的工程化修饰，以提升其靶向性与疗效，推动临床前开发，助力尊龙凯时在生物医疗领域的创新与发展。